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第三章 全是脱靶点

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正饶有兴致地观摩着大眼仔的白发老头,缓缓转身,对卢赫微微颔首,“你好,我叫海昼天,很高兴认识你。”

卢赫被按在冰箱上动弹不得,挣扎未果后,回答道:“我认识你不高兴,先回答我,你们把她怎么了?”

“哦,那个小丫头啊,她太闹腾了,只好让她先睡一会儿。”老头微微一笑,“放心,我们是来谈合作的,不会伤害你的员工。”

“你是谁啊,谁要跟你合作?不管你是怎么找来的,赶紧给我滚!否则我报警了啊!”

“哦?报警?你确定吗?你的这间实验室,有经营资质吗?”

“你是个法盲吧,我仪器都是正经厂家那里备过案的,自己用,不经营。退一万步说,宁为玉碎不为瓦全,就算有问题,我也得跟你同归于尽。都什么时代了,还玩儿私闯民宅这一套!我院子里可有监控,说不定物业这会儿就已经报警了,我劝你趁早走,我就当没见过你!”

“哈哈。”缩在角落里摆弄手机的精瘦麻秆冷不丁地笑了一声,激得卢赫起了一身鸡皮疙瘩。

“放心,物业肯定管不了你这事。你最好先冷静一下,然后我们好谈事。谈完了,我自然会走。”老头脸上的笑意更明显了。

卢赫打量着对面的两个人。老头虽然头发全白,但脸上的皱纹并不多,年纪应该不大。玩儿手机的麻秆顶着个爆炸头,一直把脸埋在阴影里,看不清容貌。至于正按着自己的壮汉,不管他相貌几何,卢赫都打不过他。

完全没有反击的机会,他索性做出妥协的样子,口气放软:“好,好。谈,我们谈。你先让他松开我,我颈椎不好一会儿该给我搞晕了。”

老头用眼神示意了壮汉,后者缓缓放开了卢赫。

卢赫活动了一下肩膀,走到菜菜身边探了一下鼻息,然后拉了一把椅子坐了下来,“谈吧。”

老头饶有兴致地点了几下鼠标调出了电脑桌面上的脱靶分析软件,看了几眼,悠悠地转身,“CRISPR-CAS9,简单易学又好用。但它有个缺点,它与靶点的特异性结合需要NGG。火焰龟的碱基序列,你应该很熟悉吧,NGG可不多啊。如果用CRISPR,很容易会脱靶的。所以,你是用了神话核酸酶TALEN还是锌指?”

“TALEN虽然很容易设计,但是组装起来的难度只增不减,细胞毒性又强,还不如锌指。本来给乌龟做导入就已经够难的了,再来点毒性,怕是成功的几率还不如中彩票大。”

“所以呢。”老头慢慢渡步到卢赫面前,俯视着他,“你用的是锌指,对吧?”

卢赫抬眼与老头对视,没有说话。

“在那个锌指技术专利还没有过期的年代,你们那个经费充足出手阔绰的实验室,买下了圣加蒙公司的锌指设计平台。依托这样的资源,你组装了一个完美无缺的锌指结构,敲掉了黑色素表达相关的位点,编辑出了一只通体金黄的火焰龟。”

“你的运气出奇的好,这是个编辑后的突变是双等位基因突变,所以一代编辑龟是个纯合子,它的子一代要么是高系数宽纹,要么是金边大翅膀。我推测的没错吧?南州湾大学里德实验室唯一一位没有顺利毕业的研究生,卢赫。”

“人生在世,要生活下来,总要想法子挣钱。在钱面前,学术什么的,当然就显得不那么重要。你的锌指技术,让你年纪轻轻就过上了这么富裕的生活。凭这一点,我是十分欣赏你的。”

“所以,这位曾经的学术新星,现在的人气龟商。你有没有兴趣,帮我个忙,用你的锌指技术,编辑一下这份基因。”老头说着,从麻秆手中接过一个平板电脑,摆在了卢赫的眼前。

这是一份180Mb的基因组。卢赫甚至没有翻页,仅凭大小就猜出这是2000年时被测出全基因组的黑腹果蝇,抬眼道:“怎么了?这有什么特殊的吗?”

“好!果然是当年的高材生。”老头嘴角上扬,“凭这点基本信息,就能知道是哪种生物,基本功很扎实呀。不过呢,关键点不在这里,你继续往下看。”

卢赫不以为然地翻了页,在读完第二页之后,他越翻越快,本是了无兴致的脸上逐渐写满了疑惑与震惊。

这是一份黑腹果蝇的基因组演化报告。果蝇不断被随机用CRISPR-CAS9技术敲除或敲入基因。脱靶分析显示,随着代数的增加,脱靶位点越来越带多,子代的成活率也越来越低。在322代时,子代无一活。

而测序结果更加出乎意料。从300代开始,碱基序列上的NGG就越来越少,无论怎样设计向导RNA,都无法完成与靶点的特异性结合。

而在之后的20代里,即便停止了编辑,NGG也仍然在逐渐减少,直至在322代中,关键位点全部都无法表达造成了细胞死亡。

虽然演化报告里没有附上各个子代果蝇的图片,但卢赫仍然可以想象得到,那些被编辑的后代,一定会长成鬼都不认的样子,存活率极低。想要维持那么多代的话,至少要养几万箱的果蝇。真是吃饱了撑的没事干!

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