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微生物知识点(35)

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2.3 病毒感染对免疫系统影响:

(1)引起免疫抑制。

禽白血病病毒、马立克氏病病毒、传染性法氏囊病病毒、传染性贫血病毒。

细菌病原会引起免疫抑制→霉形体也会(少)

很多病毒都会引起免疫抑制(多)

(2)对免疫活性细胞的杀伤。

如 HIV 对Th 细胞具有较强的亲和性和杀伤性。

(3)引起自身免疫性疾病。

主要是细胞内隐蔽抗原暴露或病毒感染细胞出现新抗原,这些细胞可成为靶细胞而受到免疫细胞和免疫因子的作用,而后发生自身免疫性疾病

分子模拟引起的自身免疫损伤

→分子模拟指宿主细胞成分与病毒蛋白质之间存在分子结构的线性或构象同源性

→如柯萨奇病毒是一种肠病毒——引起心肌炎

第十八章 病毒的检测(重要)

检测病毒的方法

①病毒的分离培养技术

②电镜直接检测病毒

③免疫学方法检测病毒

④分子生物学方法检测病毒

⑤其他(流式细胞术、基因芯片技术、蛋白质芯片)

分离与鉴定不一样

第一节 病毒的分离和鉴定(到底什么病毒,是否具有致病性)

①病毒分离培养是诊断病毒性疾病金标准,特异性强,能发现新病毒,反应传染性,可在实验动物中验证。

②不足:

(1)耗时长,一般只能做回顾性诊断

(2)成本和技术要求高,敏感性不高

(3)有些病毒无法或极难培养

(4)不同的病毒需要不同的分离方法

1.分离病毒的病原学意义

①从机体组织、脑脊液、血液、眼部、水泡液分离到任何病毒均可认为具有高度病原学意义;尿液中检出病毒也有病原学诊断意义。

②从呼吸道、阴道、肠道标本分离病毒的病原学意义需考虑这些病毒是否有无症状携带者和长期排毒者。

③如果同时从同一发病动物的多个部位分离到同一种病毒,其病原学意义较大;如果仅从某种标本分离到病毒,病原学意义则较小。

④分离培养呈阴性结果时,应考虑的因素:

(1)细胞的敏感性

(2)是否有细菌或真菌的污染

(3)是否接种量或病毒含量过低等

⑤结合恢复期与急性期血滴滴度之比判断所分离到的病毒与某一特定疾病的关系。

(分离到微生物并不能说明为本次疫病病原,要做动物实验)

2.病毒的分离与鉴定的基本过程:

①病毒材料的采集与准备

②病毒的分离与培养

③病毒的理化特性测定

④病毒的血清学鉴定

⑤病毒的分子学鉴定等

2.1 病毒材料的采集与准备

病料采集:

①病料采集适当与否,直接影响病毒的检测结果。

②一般可采集发病或死亡动物的组织病料、分泌物或粪便等,主要因动物及病毒种类而异。

病料的处理:

①采集的器官或组织样本

②分泌物或渗出液、粪便

③咽喉拭子

(支原体、衣原体、立克次体过滤不能除去)

2.2 病毒的分离与培养:

①实验动物

②鸡胚

③细胞培养→最常用于病毒分离培养的方法

(朊病毒,疯牛病目前无法培养)

2.2.1 动物接种:

①最原始方法

②分离和鉴定病毒

③增殖病毒以制备抗原和疫苗

④病毒实验研究

常用动物:本动物(马、牛、羊、猪、鸡、鸭、鹅) 小白鼠、豚鼠、家兔、鸽子

接种途径:

鼻腔内、皮内、皮下、腹腔、静脉、肌肉、脑内

(接种最多:肌肉、皮下、黏膜)

动物接种优点和缺点

优点:操作简便

缺点:

①动物体内存在特异性抗体

②动物体内带有病毒(可通过使用无菌动物解决)

2.2.2 鸡胚培养:

一般用 9~12 日龄鸡胚

①绒毛尿囊膜

②尿囊腔

③羊膜腔

④卵黄囊

⑤脑内

⑥静脉

很多哺乳类病毒不在鸡胚上生长(不适应)→牢记!!实验需掌握

鸡胚培养病毒的优点和缺点

优点:经济、简便、鸡胚易得

缺点:

①有些鸡胚带有母源抗体

②也可能带有病毒

③很多病毒在鸡胚中不生长

2.2.3 细胞培养:

①将离体活组织块或分流的活细胞加以培养统称为组织培养,后者又称单层细胞培养。

②细胞培养适于绝大多数病毒生长,是病毒实验室的常规技术。

细胞培养的特点:

(1)细胞的生理特性基本一致

(2)对病毒的感染性一致

(3)没有实验动物的个体差异

(4)重复性好

(5)与实验动物相比,通过观察细胞病变或结合免疫学技术检测判断结果。

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